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細(xì)胞培養(yǎng)瓶的選擇

更新時(shí)間:2016-06-20      點(diǎn)擊次數(shù):3448

細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇

 

 

細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類(lèi)型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?br /> 

(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇

不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),無(wú)論是貼壁和懸浮細(xì)胞,一般選用平底板。測(cè)吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì), 標(biāo)示"Tissue Culture (TC) Treated"是養(yǎng)細(xì)胞用的。

U型或V型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸刺激,這時(shí)一般會(huì)選用U型板,因?yàn)榧?xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi)。圓底培養(yǎng)板還會(huì)用于同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn),需要用細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng),如"混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)"等。V型板常用做細(xì)胞殺傷、免疫學(xué)血凝集實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞殺傷這種實(shí)驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后,低速離心)。

 

(2)Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別

Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計(jì)便于對(duì)晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。

細(xì)胞培養(yǎng)板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)與伸展。當(dāng)然還有浮游細(xì)胞的生長(zhǎng)材料,同時(shí)還有l(wèi)ow binding surface

 

(3)細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別

酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),也可以用來(lái)測(cè)蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè),需要更高的要求和特定的酶標(biāo)工作液。

 

(4)常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量

不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過(guò)多會(huì)影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。

常用的培養(yǎng)器皿

培養(yǎng)器皿

底面積(cm2

加培養(yǎng)液量(mL)

可獲細(xì)胞量

96孔培養(yǎng)板

0.32

0.1

105

24孔培養(yǎng)板

2

1.0

5×105

12孔培養(yǎng)板

4.5

2.0

106

6孔培養(yǎng)板

9.6

2.5

2.5×106

4孔培養(yǎng)板

28

5.0

7×106

3.5cm培養(yǎng)皿

8

3.0

2.0×106

6cm培養(yǎng)皿

21

5.0

5.2×106

9cm培養(yǎng)皿

49

10.0

12.2×106

10cm培養(yǎng)皿

55

10.0

13.7×106

25cm塑料培養(yǎng)瓶

25

5.0

5×106

75cm塑料培養(yǎng)瓶

75

15~30

2×107

25cm玻璃培養(yǎng)瓶

19

4.0

3×106

100cm玻璃培養(yǎng)瓶

37.5

10.0

6×106

250cm玻璃培養(yǎng)瓶

78

15.0

2×107

2500cm旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶

700

100~250

2.5×108

注:各種單層生長(zhǎng)的細(xì)胞在培養(yǎng)皿中長(zhǎng)滿(mǎn)的細(xì)胞數(shù),主要取決于器皿底表面積和細(xì)胞體積的大小。上表以Hela細(xì)胞為例給出的可獲細(xì)胞量?jī)H作參考。

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