国产精品国产三级区别第一集,亚洲精品国产成人,精品人妻无码一区二区三区,人妻熟妇乱又伦精品视频

咨詢熱線

15000266580

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  如何拯救被污染的細胞

如何拯救被污染的細胞

更新時間:2016-06-15      點擊次數(shù):3935

 夏天到了,細胞更容易被污染,很多養(yǎng)細胞的朋友在這方面困惑頗多,今天針對貼壁生長的細胞談?wù)劇?在討論之前,大家首先要有一個概念,即潔凈區(qū),并不是沒有細菌,而是細菌的數(shù)量非常少,在我們的潔凈操作臺里,并不是真正一個細菌都沒有的,所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進入培養(yǎng)體系細菌的數(shù)量。 所以處理細菌污染的重要原則就是:無限地稀釋細菌的濃度,無限地減少細菌的數(shù)量!

對于細菌污染(常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌);

污染處理流程

1、將污染的培養(yǎng)液倒掉,轉(zhuǎn)燒瓶口,加入10 mlPBS,適當晃動清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。

2、繼續(xù)加入10mlPBS,同樣方法晃動,清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。

3、繼續(xù)加入5mlPBS,同樣方法洗瓶,主要是培養(yǎng)面,然后倒掉。

4、重復(fù)步驟3再洗。

5、重復(fù)步驟3再洗。

6、加入3-5ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。

7、加入3ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。

8、再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。

9、加入10ml培養(yǎng)液,加入2ml雙抗,放置培養(yǎng)箱培養(yǎng),5小時之后,倒掉培養(yǎng)基,加入PBS洗瓶兩次,然后加入胰酶消化,吹打后置于離心機800-1000r/min離心,然后洗一次。置于新的培養(yǎng)瓶里培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。

10、24h之后,視情況換液,若仍然污染嚴重,培養(yǎng)基渾濁,重復(fù)以上步驟,若看不到污染物,則繼續(xù)步驟1)、3)、4)、6)、8),然后加入培養(yǎng)液培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。

11、24h之后,若仍污染嚴重,可再重復(fù)一次,若還污染只能棄之(不過一般沒有出現(xiàn)這種情況),若鏡下不見污染物,則換液PBS洗瓶,正常培養(yǎng)。

 

若為霉菌或者真菌污染:

     加入兩性霉素B清洗和培養(yǎng),終濃度一般為2.5μg/ml(在30μg/ml時會有細胞毒性)。另外也可以選擇在培養(yǎng)基里加3ug/ml的制霉菌素或放線菌素D。 其它操作同;

 

若為支原體污染有幾種支原體清除劑,

     1.BM-Cyclin(就是泰妙菌素+米諾環(huán)素)2.環(huán)丙沙星,這也是一種支原體較為敏感的抗生素,3.MRA,這個是商業(yè)化的支原體去除劑(Mycoplasma Removal Agent)是喹諾酮族抗生素的衍生物使用后發(fā)覺,采用泰妙菌素和米諾環(huán)素的效果更好些,支原體耐藥率低,同時對細胞的抑制也較低。;

 

除此還是需要你在無菌觀念和無菌操作上下大功夫加強了,預(yù)防為主,還是要強調(diào)無菌操作,尤其注意血清的質(zhì)量,這個是主要來源。

 

在操作的過程中,一定要小心操作動作,輕柔緩慢,切忌大動作魯莽。防止細胞脫落。當然如果你的細胞仍有富余或者凍存的,我還是建議你把污染的扔掉,再復(fù)蘇方便省事。這個拯救細胞還是主要針對你就只剩這一瓶細胞無路可退的時候。

聯(lián)系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區(qū)四平路710號7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復(fù)祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號:滬ICP備10013034號-2     sitemap.xml
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸
国产女主播喷水视频在线观看| 在教室伦流澡到高潮h免费视频| 国产免费av在线观看| 精品无码国产一区二区三区.| 一起洗澡的老师免费播放| 国产精品免费无遮挡无码永久视频 | 欧美 变态 另类 人妖| 无码日韩人妻AV一区二区三区| 国产精品一区二区AV| 免费国偷自产拍精品视频| 亚洲人成在线观看| 国产三级在线观看完整版| 免费又黄又爽又色的视频| 99草草国产熟女视频在线| 10000拍拍18勿入免费看| 久碰人妻人妻人妻人妻人掠| 国产又色又爽又黄的免费软件| 少妇精品揄拍高潮少妇| 国产激情精品一区二区三区| 午夜dj在线观看免费视频| 久久爱综合久久爱久久爱| 国产毛片精品一区二区色欲黄a片 国产又黄又爽又色视频免费软件 99在线精品免费视频九九视 | 咒术回战第二季免费观看| 亚洲VA天堂VA欧美ⅤA在线| 久久人人爽天天玩人人妻精品| 国产人妻大战黑人20P| 国产古装妇女野外A片| 99久久国产宗和精品1上映 | 自拍偷在线精品自拍偷无码专区 | 亚洲最大成人网| 我的少妇邻居全文免费阅读| 亚洲一区二区女搞男| 成人性生交大片免费看一| 女公务员人妻呻吟求饶| 国产女人的高潮国语对白入口| 日韩高清无码| 亚洲AV无码专区在线播放中文| 国产精品一区二区AV不卡| 欧美大黑bbbbbbbbb| 亚洲第一极品精品无码久久| 亚洲天天做日日做天天爽|