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ATCC細(xì)胞株應(yīng)用廣泛

更新時(shí)間:2016-01-26      點(diǎn)擊次數(shù):2748
    ATCC細(xì)胞株宜于微生物生長(zhǎng)發(fā)育、節(jié)省原料等優(yōu)勢(shì),一般在培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面應(yīng)用廣泛。
  ATCC細(xì)胞株的配制
  (1)稱量和熬煮
  按細(xì)胞株配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。
  (2)加熱溶解
  把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂*溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。
  (3)分裝
  按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的細(xì)胞株分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使細(xì)胞株沾在管口或瓶口上造成污染。
  分裝量:ATCC細(xì)胞株約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶?jī)?nèi)以不超過(guò)其容積的一半為宜;半固體細(xì)胞株以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
  (4)加棉塞
  細(xì)胞株分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入細(xì)胞株內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
  (5)包扎
  加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號(hào)筆注明細(xì)胞株名稱、組別、配制日期。
  ATCC細(xì)胞株配制注意事項(xiàng)
  1.細(xì)胞株經(jīng)滅菌后,必須放在37C溫箱培養(yǎng)24h,無(wú)菌生長(zhǎng)者方可使用。
  2.ATCC細(xì)胞株一般不需要調(diào)pH。對(duì)于要調(diào)節(jié)pH的細(xì)胞株,一般用pH試紙測(cè)定其pH。如果細(xì)胞株偏酸或偏堿時(shí),可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時(shí)應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過(guò)酸或過(guò)堿破壞細(xì)胞株成分。
  3.細(xì)胞株在使用時(shí)也可以做成不含瓊脂的液體細(xì)胞株,用于菌類的震蕩培養(yǎng)。
  4.ATCC細(xì)胞株也可以加入氯霉素或土霉素,加入量為0.2g/L細(xì)胞株,主要是為了抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),減少干擾性。
 
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