国产精品国产三级区别第一集,亚洲精品国产成人,精品人妻无码一区二区三区,人妻熟妇乱又伦精品视频

咨詢熱線

15000266580

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞株的篩選需要注意哪些因素

細胞株的篩選需要注意哪些因素

更新時間:2020-02-25      點擊次數(shù):1966
   細胞株在生物制藥中使用非常廣泛,細胞株培養(yǎng)條件簡單,貼壁強度適中,比較容易轉染,很適合用它來研究一般哺乳動物基因的功能。細胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物,而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質,包括生物和化學物質。
  細胞株的篩選我們要注意加藥時間以及維持濃度:
  1.由于基因轉染到細胞內之后要一段時間才能表達出蛋白質。所以細胞株篩選時不能太早;但是也不能太晚,因為轉染了外源基因的細胞代謝負荷較大,增值較慢,時間長了就會被沒有外源基因轉入的細胞所淹沒,終導致篩選不出陽性克隆,一般要在轉染24小時之后才開始加篩選。隨著細胞的代謝,濃度和活性都會下降,所以每3-5天都要更換一次篩選液。
  2.加抗生素的時機,主要是考慮插入到細胞基因組的抗性基因是否已經得到表達。一般是轉染48小時后加入抗生素。挑出單克隆后就可以用維持濃度,一般是穩(wěn)定細胞株篩選濃度的1/2。
  關于維持濃度,有人說細胞會出現(xiàn)對抗生素的抗性,應不斷提高其濃度。而且如果要挑選幾個陽性克隆中較高表達的克隆的話,可以調整抗生素的濃度。當然,抗性基因高表達,目的基因不一定就跟著高表達。
  此外,也需穩(wěn)定細胞系構建培養(yǎng)液:
  加藥篩選穩(wěn)定細胞株約6天左右,細胞會大量死亡,孔中只剩下的細胞*。這時會出現(xiàn):
  1.死亡的細胞會裂解釋放出有害物質,導致那些有表達陽性細胞死亡,即非選擇性死亡,因此要及時換液。
  2.孔中細胞數(shù)目很少,細胞之間的信號會變得很弱,也會導致陽性細胞的狀態(tài)不佳甚至死亡。這個時候需要一種特殊的培養(yǎng)液,再轉染后篩選穩(wěn)轉細胞株過程中就可以應用這種培養(yǎng)基。
  3.適當增加血清濃度。
聯(lián)系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區(qū)四平路710號7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號:滬ICP備10013034號-2     sitemap.xml
技術支持:化工儀器網    管理登陸
精品人妻系列无码人妻在线不卡| 日韩免费高清播放器| 精品久久久久久无码中文野结衣| 国产高清在线精品一区| 亚洲AV无码国产精品色午夜软件| 亚洲一区二区三区影院| 一本精品99久久精品77| 蜜臀av免费一区二区三区| 国产乱码精品一区二区三区四川人| 漂亮人妻被强了bd影片| 久久久97精品国产一区蜜桃| 人人弄狠狠婷五月丁香| 日韩精品无码一区aaa片| 亚洲精品欧美二区三区中文字幕 | 蜜臀AV无码一区二区三区| 夜鲁鲁鲁夜夜综合视频欧美| 国产欧美日韩丝袜高跟鞋| 播放灌醉水嫩大学生国内精品| 极品教师在线观看免费完整版| 一区二区三区无码被窝影院| 国产亚洲精品久久久久久久| 人妻办公室出轨上司hd院线| 亚洲中文久久精品无码| 国产jk精品白丝av在线观看| 久久中文字幕无码A片不卡古代| 丰满欧美大爆乳性猛交| brazzers欧美| 欧美老熟妇欲乱高清视频| 少妇做爰特黄A片免费看9588 | 日韩精品一区二区三区中文| 男女免费观看做爰视频在线观看| 97在线视频人妻无码| 中国a级毛片免费观看| 亚洲AV鲁丝一区二区三区| 亚洲av无码第一区二区三区| 欧美性巨大╳╳╳╳╳高跟鞋| 国产AV在线播放| 老湿机香蕉久久久久久| 国产边打电话边被躁视频| 国产精品日本无码久久一老A| 国产AV国片偷人妻麻豆|