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  • 2018

    12-13

    幾種常用的物理滅菌方法匯總(一)加熱滅菌法加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸,導(dǎo)致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時,有水分存在,蛋白質(zhì)容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕,濕熱的穿透力比干熱大。干熱滅菌法常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法兩種。(二)紫外線滅菌法是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200~300nm,滅菌力強的波長是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性,...

  • 2018

    11-30

    STR細胞鑒定意義導(dǎo)讀:新買到的細胞,實驗室傳了幾代的細胞,又或者儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞,被污染了么?鑒定正確么?用它做研究會影響實驗結(jié)果么?沒有經(jīng)過相應(yīng)的細胞鑒定,使用了被污染的細胞,經(jīng)過大量的實驗,寫出一篇論文,但是結(jié)論被推翻,論文被召回,大量的時間、物力和人力被浪費,一切都要從頭再來。背景介紹應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的哺乳動物細胞被錯誤鑒定和交叉污染的問題,一直是一個普遍存在的突出問題。據(jù)統(tǒng)計,國外實驗室有20%左右的細胞株被錯誤鑒定和交叉污染,NIH和ATCC近...

  • 2018

    11-28

    【技術(shù)文章】細胞養(yǎng)不好?這些注意事項請收好(三)1、購買的細胞死亡或存活率不佳可能原因?細胞冷凍管解凍后,為何會有細胞數(shù)目太少的情形?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸浮細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于–80℃太久。研究人員在冷凍細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞...

  • 2018

    11-24

    一個好的ATCC細胞株有多方面要求:1.產(chǎn)量高,高的產(chǎn)量直接降低固定投資和單次生產(chǎn)成本。2.產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。產(chǎn)品質(zhì)量影響藥效和安全性。3.穩(wěn)定性。產(chǎn)量和質(zhì)量在生產(chǎn)傳代過程中不應(yīng)有大的改變。一般認為在60-90PDL產(chǎn)量變化不超過30%是可以接受的。4.與生產(chǎn)過程的相容性。細胞株需要適合大規(guī)模生產(chǎn)放大。5.合規(guī)。ATCC細胞株的構(gòu)建過程應(yīng)避免接觸或使用動物來源成分或其它可能影響安全性的成分,保證單克隆性(clonality)以及整個過程的實驗記錄完整。ATCC細胞株無菌操作注...

  • 2018

    11-15

    貼壁細胞與懸浮細胞的都有哪些不同你都知道么一、貼壁生長的細胞核懸浮生長的細胞都有很多種?;铙w體內(nèi)的細胞當(dāng)離體置于體外培養(yǎng)時大多數(shù)均以貼壁方式生長,主要包括正常細胞和腫瘤細胞,比如成纖維細胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細胞,內(nèi)分泌細胞,黑色素細胞及各種腫瘤細胞等。少數(shù)細胞在體外培養(yǎng)是懸浮生長,包括一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細胞,尤其是血液白細胞以及癌腫細胞。二、貼壁細胞與懸浮細胞在培養(yǎng)條件上的區(qū)別貼壁細胞要加血清,不貼壁的可以不加血清。三、...

  • 2018

    10-27

    病毒載體構(gòu)建穩(wěn)定細胞株有什么優(yōu)勢?化學(xué)試劑介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法和電轉(zhuǎn),整合率低,同時整合位點不穩(wěn)定,易發(fā)生再次丟失的情況,而且整合位點一般都在轉(zhuǎn)錄活躍區(qū)之外,所以并不是理想的穩(wěn)定整合工具。另外,整合后的拷貝數(shù)是由核內(nèi)的外源DNA局部濃度,而不是轉(zhuǎn)染時的DNA的量決定,而化學(xué)方法在輸入質(zhì)粒載體入核的效率比電轉(zhuǎn)和病毒載體相比要低得多,導(dǎo)致其轉(zhuǎn)染相同細胞所用質(zhì)粒載體用量要大大高于其它方法,造成入核質(zhì)粒載體量難以控制,這也解釋了為什么化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和其它兩種方比,更傾向于得到串聯(lián)多拷貝。以上...

  • 2018

    10-19

    ATCC細胞復(fù)蘇和培養(yǎng)*手冊細胞是我們很多基礎(chǔ)研究的基礎(chǔ),那么細胞能否被成功復(fù)蘇就尤為重要了。美國菌種保藏中心,又稱美國模式菌種收集中心(ATCC),是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的,非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細胞、標(biāo)準品、菌株達兩萬多種。以下是來自ATCC的*說明,小凳子搬起來。01收到細胞的注意事項凍存的ATCC細胞株和雜交瘤細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫。收到凍存細胞后,可以立即解凍復(fù)蘇,去除二甲基亞砜(DMSO)后進行細胞培養(yǎng)。如果不立即復(fù)蘇培養(yǎng)細胞...

  • 2018

    9-28

    白血病細胞株來告訴你白血病的病因一、輻射損傷電離輻射致白血病作用已在動物實驗中得到證實,而對人類的致白血病作用也從以下的事實得到提示:早期不加防護的放射線工作者,其白血病發(fā)病率比一般醫(yī)生高8-9倍;強直性脊柱炎的患者采用放射性治療者,白血病發(fā)病率比一般人高10倍,日本的廣島和長畸原子彈爆炸后,遭受輻射地區(qū)與末遭輻射地區(qū)的居民之間的白血病發(fā)病率相差30倍。二、化學(xué)因素已知很多化學(xué)物質(zhì)有致白血病作用,如工業(yè)中廣泛應(yīng)用的苯。藥物中的抗癌劑(尤以烷化劑)、乙雙嗎啉、氯霉素、保泰松、安...

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